giới thiệu cơ bản
Lysate hồng cầu là một trong những phương pháp đơn giản và dễ dàng nhất để loại bỏ hồng cầu, tức là tách hồng cầu bằng lysate, không làm hỏng tế bào có nhân và có thể loại bỏ hoàn toàn hồng cầu. Tách lysate là một phương pháp loại bỏ tế bào hồng cầu nhẹ, chủ yếu được sử dụng để tách và tinh chế các tế bào mô được phân tán bằng cách tiêu hóa enzyme, tách và tinh chế tế bào lympho và loại bỏ các tế bào hồng cầu trong các thí nghiệm về protein mô và nhân chiết xuất axit Các tế bào mô thu được từ quá trình ly giải tế bào hồng cầu không chứa tế bào hồng cầu và có thể được sử dụng tiếp cho quá trình nuôi cấy sơ cấp, dung hợp tế bào, tế bào học dòng chảy, tách và chiết xuất axit nucleic và protein, v.v.
Hướng dẫn sử dụng
mẫu tế bào mô
1. Các mô tươi được tiêu hóa bởi tuyến tụy/enzym hoặc collagenase và phân tán thành huyền phù tế bào đơn lẻ, và phần nổi phía trên được loại bỏ bằng cách ly tâm.
2. Lấy lysate ELS từ tủ lạnh ở 4°C, thêm lysate ELS vào kết tủa tế bào theo tỷ lệ 1:3-5 (thêm 3-5ml lysate cho 1ml tế bào được nén), thổi nhẹ và trộn.
3. Ly tâm ở tốc độ 800-1000 vòng/phút trong 5-8 phút và loại bỏ phần chất lỏng trong suốt màu đỏ phía trên.
4. Phần kết tủa được thu thập và ly tâm với dung dịch Hank hoặc dung dịch nuôi cấy không có huyết thanh trong 2-3 lần.
5, nếu crack chưa hoàn thành/hoàn thành có thể lặp lại bước 2 và 3.
6. Tế bào hồi phục cho các thí nghiệm tiếp theo; Nếu RNA được chiết xuất, tốt nhất nên làm như vậy trong dung dịch được chuẩn bị từ Bước 4 bằng nước DEPC
Tế bào hồng cầu có vòng đời rất ngắn, chỉ 120 ngày, nhưng chúng tái tạo máu rất nhanh, và trong trường hợp này, chúng đặc biệt có khả năng phân chia tế bào, và chúng là tế bào phân chia nhanh nhất trong tất cả, vì vậy tế bào này rất quý giá, vì vậy nó rất hữu ích cho việc nuôi cấy tế bào. Nó rất đơn giản, nó không có bất kỳ bào quan nào trong đó, chỉ có màng tế bào và protein.