> Blog > Tin tức ngành

Các chức năng của bộ ELISA là gì?

2022-12-23

Bộ ELISA dựa trên pha rắn của kháng nguyên hoặc kháng thể và đánh dấu enzyme của kháng nguyên hoặc kháng thể. Kháng nguyên hoặc kháng thể liên kết với bề mặt của chất mang rắn vẫn giữ được hoạt tính miễn dịch của nó và kháng nguyên hoặc kháng thể được đánh dấu bằng enzym vẫn giữ được cả hoạt tính miễn dịch và hoạt tính của enzym. Tại thời điểm xác định, mẫu thử nghiệm (trong đó kháng thể hoặc kháng nguyên được đo) phản ứng với kháng nguyên hoặc kháng thể trên bề mặt của chất mang rắn. Phức hợp kháng nguyên-kháng thể hình thành trên chất mang rắn được tách ra khỏi các chất khác trong chất lỏng bằng cách rửa.

Các kháng nguyên hoặc kháng thể được đánh dấu bằng enzyme được thêm vào, chúng cũng liên kết với chất mang rắn bằng phản ứng. Lúc này lượng enzym trong pha rắn tỷ lệ thuận với lượng cơ chất trong bệnh phẩm. Sau khi thêm cơ chất của phản ứng enzyme, cơ chất được enzyme xúc tác để trở thành các sản phẩm có màu. Lượng sản phẩm có liên quan trực tiếp đến lượng chất được thử nghiệm trong mẫu thử, do đó, phân tích định tính hoặc định lượng có thể được thực hiện tùy theo độ sâu của màu.

Hiệu quả xúc tác cao của các enzyme gián tiếp khuếch đại kết quả của phản ứng miễn dịch, làm cho xét nghiệm có độ nhạy cao. ELISA có thể được sử dụng để xác định kháng nguyên, nhưng cũng có thể được sử dụng để xác định kháng thể.

Nguyên tắc cơ bản của bộ ELISA
Nó sử dụng phản ứng đặc hiệu của kháng nguyên và kháng thể để kết nối đối tượng với enzyme, sau đó tạo ra phản ứng màu giữa enzyme và cơ chất để xác định định lượng. Đối tượng đo lường có thể là kháng thể hoặc kháng nguyên.

Có ba thuốc thử cần thiết trong phương pháp xác định này:
â Kháng nguyên hoặc kháng thể pha rắn (chất hấp phụ miễn dịch)
â¡ Kháng nguyên hoặc kháng thể được đánh dấu bằng enzyme (dấu hiệu)
• cơ chất cho hoạt động của enzym (chất tạo màu)

Trong phép đo, trước tiên, kháng nguyên (kháng thể) được liên kết với chất mang rắn, nhưng vẫn duy trì hoạt động miễn dịch của nó, sau đó, một liên hợp (dấu hiệu) của kháng thể (kháng nguyên) và enzyme được thêm vào, vẫn duy trì hoạt động miễn dịch và enzyme ban đầu. hoạt động. Khi cộng hợp phản ứng với kháng nguyên (kháng thể) trên chất mang rắn, cơ chất tương ứng của enzyme được thêm vào. Tức là có xúc tác phản ứng thủy phân hay còn gọi là REDOX và tạo màu.

Màu sắc mà nó tạo ra tỷ lệ thuận với lượng kháng nguyên (kháng thể) cần đo. Phẩm màu này có thể quan sát bằng mắt thường, kính hiển vi quang học, kính hiển vi điện tử, cũng có thể đo bằng máy đo quang phổ (dụng cụ đánh dấu enzym). Cách thức đơn giản, thuận tiện, nhanh chóng và cụ thể.

Trước:Giới thiệu tấm Elisa

Kế tiếp:Tại sao nuôi cấy tế bào ly giải các tế bào hồng cầu đầu tiên?