Việc lựa chọn dụng cụ nuôi cấy phù hợp là rất quan trọng để đảm bảo sự phát triển tế bào và kết quả thử nghiệm tối ưu. Khi chọn bình nuôi cấy tế bào, điều quan trọng là phải xem xét các yếu tố như loại tế bào, mục đích cụ thể của quá trình nuôi cấy, quy mô nuôi cấy, loại môi trường nuôi cấy, vật liệu và kích thước của bình, xử lý bề mặt, nắp đậy thích hợp. trao đổi khí và khả năng tương thích của chúng với thiết bị thí nghiệm của bạn.
Dưới đây là những yếu tố chính cần xem xét khi lựa chọn bình nuôi cấy tế bào phù hợp
1. Chọn bình nuôi cấy tế bào theo loại tế bào
Tế bào kết dính
Những tế bào này cần một bề mặt để bám vào và lan ra. Đối với các tế bào bám dính, bạn sẽ cần các mạch có diện tích bề mặt cung cấp đủ không gian để tế bào bám vào và phát triển.
Ví dụ: Bình nuôi cấy mô, đĩa petri và đĩa nhiều giếng.
Tế bào huyền phù
Những tế bào này phát triển nổi trong môi trường nên bề mặt không được xem xét.
Ví dụ
Bình nuôi cấy mô, bình quay hoặc lò phản ứng sinh học để nuôi cấy huyền phù quy mô lớn.
2. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên kích thước (Dung tích thể tích)
Văn hóa quy mô nhỏ
Đối với các thí nghiệm quy mô nhỏ hoặc sàng lọc hiệu suất cao, các bình nhỏ hơn là lý tưởng.
Ví dụ Đĩa nhiều giếng (đĩa nuôi cấy 6, 24, 96 tế bào),
đĩa Petrihoặc bình T25.
Văn hóa quy mô lớn
Nếu bạn cần phát triển số lượng lớn tế bào, bình lớn hơn hoặc lò phản ứng sinh học sẽ tốt hơn.
Ví dụ bình nuôi cấy tế bào T75 và T175, bình phản ứng sinh học hoặc bình quay để nuôi cấy tế bào huyền phù.
3. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên cách xử lý bề mặt
Bề mặt được xử lý nuôi cấy mô
Các mạch được xử lý trước để thúc đẩy sự gắn kết của tế bào, làm cho chúng phù hợp với các loại tế bào bám dính. Chúng thường được phủ bằng các chất như collagen, fibronectin hoặc các thành phần ma trận ngoại bào khác.
Bề mặt không được xử lý
Lý tưởng cho nuôi cấy huyền phù hoặc khi tế bào không cần bám dính vào bề mặt. Chúng thường được sử dụng cho các tế bào phát triển tự do trong môi trường.
4. Chọn bình nuôi cấy tế bào theo vật liệu
Polystyrene thường được sử dụng cho các ứng dụng nuôi cấy tế bào tiêu chuẩn. Nó trong suốt, cho phép kiểm tra trực quan dễ dàng và hoạt động tốt cho cả tế bào bám dính và tế bào huyền phù.
Polycarbonate hoặc Polypropylen được sử dụng cho một số ứng dụng lò phản ứng sinh học nhất định và cho các bình chứa yêu cầu tính linh hoạt hơn hoặc xử lý bề mặt cụ thể.
Thủy tinh được sử dụng để nuôi cấy mô tiêu chuẩn do chi phí cao và dễ vỡ, bình thủy tinh có thể phù hợp cho các ứng dụng cụ thể hoặc nuôi cấy quy mô lớn.
Bình
Đối với nuôi cấy tế bào nói chung, bình T (T25, T75, T150) thường được sử dụng. Bề mặt phẳng cung cấp một khu vực tốt cho sự gắn kết và phát triển của tế bào. Chúng có thể được sử dụng cho cả tế bào bám dính và nuôi cấy huyền phù nếu duy trì được các điều kiện thích hợp.
Đĩa Petri
Phổ biến đối với nuôi cấy quy mô nhỏ và cho các thí nghiệm yêu cầu quan sát, chẳng hạn như xét nghiệm hình thành khuẩn lạc.
Đĩa nhiều giếng
Đây là những hữu ích cho việc sàng lọc thông lượng cao và các thí nghiệm quy mô nhỏ hơn. Đĩa có 6, 12, 24, 48,
96, hoặc 384 giếng có sẵn và lý tưởng cho các xét nghiệm dựa trên tế bào, giải phóng cytokine, thử nghiệm thuốc và các ứng dụng hiệu suất cao khác.
Bình quay
Được sử dụng để nuôi cấy tế bào huyền phù, đặc biệt với thể tích lớn hơn, nơi cần khuấy trộn có kiểm soát để duy trì sự phát triển của tế bào và tránh tế bào bị vón cục.
Lò phản ứng sinh học
Đối với nuôi cấy huyền phù quy mô lớn, lò phản ứng sinh học cho phép kiểm soát phức tạp hơn các điều kiện môi trường (ví dụ: độ pH, nhiệt độ, oxy hóa) và được sử dụng để sản xuất khối lượng lớn, chẳng hạn như trong sản xuất dược phẩm sinh học.
6. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên tính vô trùng và thông gió
vô trùng
Đảm bảo bình chứa được vô trùng hoặc đã được khử trùng để tránh nhiễm bẩn. Hầu hết các bình nuôi cấy thương mại đều được khử trùng trước nhưng luôn kiểm tra bao bì.
Thông gió
Một số bình, chẳng hạn như bình, có nắp thông hơi hoặc bộ lọc để cho phép trao đổi không khí đồng thời ngăn ngừa ô nhiễm. Điều này rất cần thiết khi nuôi cấy tế bào ở điều kiện mật độ cao.
7. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên sự thuận tiện khi sử dụng
Có thể hấp tiệt trùng và dùng một lần
Một số bình nuôi cấy có thể được hấp khử trùng để tái sử dụng (ví dụ: chai thủy tinh, một số bình nhựa nhất định), trong khi một số khác chỉ sử dụng một lần và dùng một lần (ví dụ: đĩa petri bằng nhựa, đĩa nhiều giếng).
Xử lý và vận chuyển
Xem xét sự dễ dàng của việc chuyển tế bào giữa các mạch. Ví dụ, các đĩa nhiều giếng có thể yêu cầu các đĩa chuyên dụng để dễ dàng xử lý bằng thiết bị như pipet tự động.
8. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên thể tích môi trường nuôi cấy
Chọn bình có thể chứa được thể tích môi trường nuôi cấy mong muốn mà không lãng phí nguồn lực. Nếu làm việc với môi trường nuôi cấy thể tích lớn, có thể cần bình lớn hơn hoặc lò phản ứng sinh học, trong khi thể tích nhỏ hơn sẽ phù hợp với đĩa hoặc đĩa nuôi cấy tế bào.
9. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên cân nhắc về chi phí
Dùng một lần so với tái sử dụng
Bình nhựa dùng một lần có hiệu quả về mặt chi phí và giảm nguy cơ ô nhiễm, nhưng chúng có thể tốn kém đối với các hoạt động quy mô lớn. Bình thủy tinh tái sử dụng có chi phí ban đầu cao hơn nhưng có thể được khử trùng và tái sử dụng nhiều lần, giúp tiết kiệm hơn khi sử dụng lâu dài.
Hiệu quả khối lượng
Đảm bảo kích thước bình thích hợp để tránh lãng phí nguyên liệu, đặc biệt khi sử dụng môi trường nuôi cấy hoặc thuốc thử đắt tiền.
10. Chọn bình nuôi cấy tế bào dựa trên yêu cầu ứng dụng cụ thể
Hình ảnh
Nếu bạn cần quan sát các tế bào dưới kính hiển vi, hãy chọn các bình có vật liệu trong suốt về mặt quang học và kích thước phù hợp để thiết lập hình ảnh của bạn (ví dụ: các đĩa nhiều giếng để sàng lọc hàm lượng cao hoặc đĩa đáy thủy tinh để chụp ảnh tế bào sống).
Kích động có kiểm soát
Đối với nuôi cấy tế bào huyền phù, hãy xem xét bình quay hoặc lò phản ứng sinh học cung cấp khả năng khuấy trộn có kiểm soát để giữ cho tế bào lơ lửng đều.
Phần kết luận
Việc lựa chọn bình nuôi cấy tế bào phù hợp đòi hỏi phải cân bằng một số yếu tố, bao gồm loại tế bào, quy mô nuôi cấy, khả năng tương thích vật liệu và nhu cầu thí nghiệm cụ thể. Các tế bào kết dính sẽ yêu cầu các bề mặt thúc đẩy sự gắn kết, trong khi các tế bào huyền phù được hưởng lợi từ thể tích lớn hơn và sự khuấy trộn. Đối với công việc ở quy mô nhỏ, đĩa nhiều giếng hoặc bình chữ T có thể là đủ, trong khi môi trường nuôi cấy lớn hơn có thể cần bình quay hoặc lò phản ứng sinh học. Luôn đảm bảo rằng các bình chứa đáp ứng các yêu cầu về vô trùng và xử lý của bạn, đồng thời cân nhắc hiệu quả chi phí dựa trên mức sử dụng của bạn.
Bằng cách xem xét các yếu tố này, bạn có thể chọn bình tối ưu cung cấp các điều kiện phù hợp cho mục tiêu thử nghiệm và nuôi cấy tế bào của bạn.