“Như chúng ta đã biết, PCR là một phương pháp thí nghiệm cơ bản trong các phòng thí nghiệm hóa sinh”. Các kết quả thử nghiệm luôn không đạt yêu cầu, có thể là do vật tư nhựa PCR bị nhiễm bẩn nhẹ hoặc nhiễu thử nghiệm do đưa chất ức chế vào. Còn có một nguyên nhân rất quan trọng khác: Lựa chọn vật tư tiêu hao không đúng cách cũng sẽ ảnh hưởng rất lớn đến kết quả thí nghiệm.
Có nhiều nguyên nhân ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm PCR: thông thường có 7 loại sau.
1. Mồi: Mồi là chìa khóa cho phản ứng đặc hiệu của PCR, tính đặc hiệu của sản phẩm PCR phụ thuộc vào mức độ bổ sung giữa mồi và DNA khuôn mẫu;
2. Enzyme và nồng độ của nó;
3. Chất lượng, nồng độ dNTP;
4. Mẫu (gen đích) axit nucleic;
5. Nồng độ Mg2+;
6. Cài đặt nhiệt độ và thời gian;
7. Số chu kỳ;
8. Thiết bị, vật tư tiêu hao, v.v.
Trong rất nhiều yếu tố ảnh hưởng, vật tư tiêu hao là một trong những yếu tố rất quan trọng và dễ bị bỏ qua.
Có nhiều loại
vật tư tiêu hao PCR: 8 ống, ống thể tích thấp, ống tiêu chuẩn, không có viền, nửa viền, có viền đầy đủ và một loạt các đĩa PCR và qPCR. Rất khó để lựa chọn và có rất nhiều Vấn đề phổ biến, hãy cùng xem những vấn đề mà mọi người lựa chọn
vật tư tiêu hao PCR, và làm thế nào để giải quyết chúng?
Tại sao
vật tư tiêu hao PCRthường được làm bằng PP?
Trả lời: Vật tư tiêu hao PCR/qPCR thường được làm bằng polypropylene (PP), vì nó là vật liệu trơ về mặt sinh học, bề mặt không dễ bám dính các phân tử sinh học, đồng thời có khả năng kháng hóa chất và chịu nhiệt độ tốt (có thể hấp khử trùng ở 121 độ) vi khuẩn và cũng có thể chịu được sự thay đổi nhiệt độ trong chu kỳ nhiệt). Những vật liệu này thường tiếp xúc trực tiếp với thuốc thử hoặc mẫu, vì vậy cần lựa chọn vật liệu chất lượng cao và kỹ thuật xử lý tốt trong quá trình sản xuất và pha chế.